Ames test
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작성일 22-11-26 08:06
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그리고 시험할 화학물질을 함유한 disk를 한천배지의 중앙에 놓는다.돌연변이유발요인조사Amestest
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돌연변이 유발 요인조사
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Ames test
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설명
세균의 돌연변이원 검정-복귀돌연변이와 정향돌연변이
Ames test(실험) 과 여러 가지 다른 미생물학적 test(실험) 은 동물을 대상으로 하여 직접 test(실험) 에 볼 필요가 있는 물 질의 수를 줄이기 위하여 사용되는 것이다.
Ames test를 하기 위해서 test(실험) 균주, s-9 혼합물, 돌연변이가 일어날 때까지의 여러 번의 세포분열이 일어날 수 있도록 소량의 히스티딘이 녹아 있는 agar로 구성된 최소 한 천배지를 만든다. 돌연변이 유발물질을 판정 시, 양성결과는 음의 대조군 (nagative control plate)상의 자연적인 전환 집락과 비교해서 상당한 집락 수의 증가를 보일 때가 얻어진다.
세균의 돌연변이원 검정-복귀돌연변이와 정향돌연변이
에임스 검벙법은 미국 캘리포니아대학의 에임스가 1970년대에 개발한 것으로 Salmonella ryphimurium의 히스티딘을 요구하는 여러 가지 성장 결함 돌연변이 균주를 사 용하여 야생형으로 역전시키는 정도로 돌연변이원의 여부를 측정(測定) 하는 것인데 검사의 감수 성을 높이기 위하여 몇가지 고안되었다. 즉 조사하고자 하는 물질이 세균에 쉽게 침투하 도록 세포벽의 일부를 손상시켰고, 대부분의 DNA손상이 회복되지 않고 돌연변이체로 될 수 있도록 uvrB유전자를 제거시켰으며, 일부는 대장균의 umuD+C+유전자와 같은 umcA+B+ 를 지닌 플라스미드 pKM101…(To be continued )
다. 그러면 확산에 의해 화학물질이 주변으로 이동하므로 disk에서 거리가 멀어질수록 그 물 질의 농도가 점차 감소할 것이다. 이에 대한 근거는 현재까지 동물 test(실험) 결과 발암물질로 알려진 300가지 이상의 물질들 중 다만 몇 퍼센트만이 Ames test(실험) 에서 복귀 빈도를 증가시키지 않았기 때문에 이는 Ames test(실험) 에서 복귀 빈도를 증가시키는 물질은 그 상당수가 발암물질일 가능성이 높다는 것이다. 배양 후 시험한 화학물질의 돌연변이 유발정도를 배지 에 생성된 집락의 수를 watch함으로 결정할 수 있따 즉 생성된 집락은 균주가 his-에서 his+로 전환되었음을 의미한다.
